METHODOLOGICAL ADAPTATION FOR GENOTOXIC AND MUTAGENIC EVALUATION USING THE Allium cepa TEST
Palavras-chave:
Ecotoxicologia, Genotoxicidade, MutagenicidadeResumo
Este trabalho teve como objetivo adaptar o protocolo de avaliação genotóxica e mutagênica de Guerra e Souza (2002). Os ensaios foram realizados com sementes de Allium cepa da variedade Baia periforme sem agroquímicos, postos a germinar em fotoperíodo de 12h, durante 72h. Após o desenvolvimento os meristemas, foram coletados, armazenados e conservados sob refrigeração (2-8ºC) em tubos contendo orceína acética 2%, por 1h, 24h, 48h e 72h. Foram realizados esmagamentos para confecção das lâminas e observadas ao microscópio óptico em objetiva de 40X. Observou-se que os meristemas conservados em até 72h apresentaram resultados satisfatórios quanto a coloração e detalhamento de cromossomos, núcleos e micronúcleos. Esta técnica difere-se das demais pela economia de tempo e recurso na utilização de equipamentos e agentes fixadores e hidrolisantes tradicionais, possibilitando ainda a conservação do material em orceína acética 2% por até 72h.
Referências
LEVAN, A. The effect of colchicines on root mitosis of Allium cepa. Hereditas, v. 24, p. 471–486, 1938.
FISKESJÖ, G. The Allium test as a standard in environmental monitoring. Hereditas, v. 102, n.1, p. 99-112, 1985.
MALINI, M.; MARIN-MORALES, M.A.; MANTOVANI, M.S.; JAMAL, C.M.; NATI, N.; PASSOS, T.S. et al. Determination of the antimutagenicity of an aqueous extract of Rhizophora mangle L (Rhizophoraceae), using in vivo and in vitro test systems. Genetics and Molecular Biology, v. 33, n. 1, p.176-181, 2010.
GALVÃO, M.; MIRANDA, D.P.; COSTA, G.M.; DILVA, A.B.; KARSBURG, I.V. Potencial mutagênico em águas coletadas em diferentes pontos no perímetro urbano no município de alta floresta – MT através do teste Allium (Allium cepa). Enciclopédia. Biosfera, v. 11, n. 21, p. 23-73, 2015.
LESSA, L.R.; CARIELLO, F.M.R. Adsorção do paracetamol em carvão ativado: regressão da citotóxicidade e mutagênicidade no sistema Allium cepa. Revista Hórus,v. 12, n. 1, p. 44-54, 2017.
PROLO JÚNIOR, S.L.; PAIXÃO, H.C.S.; SILVESTRE, L N.S.; SILVA, R.P.M.; MENEGUETTI, D.U.O. Análise Genotóxica: Métodos e Aplicações. In: Ciência, Inovação e Tecnologia na Amazônia. 1 ed.: Stricto Sensu Editora, 2019.
PALSIKOWSKI, P.A.; ROBERTO, M.M.; SOMMAGGIO, L.R.D.; SOUZA, P.M.S.; MORALES, A.R.; MARIN-MORALES, M.A. Ecotoxicity Evaluation of the Biodegradable Polymers PLA, PBAT and its Blends Using Allium cepa as Test Organism. Journal of Polymers and the Environment, v. 26, p. 938–945, 2017.
MENEGUETTI, D.U.O.; LIMA, R.A.; SILVA, F.C.; PASSARINI, G.M.; FACUNDO, J.B.; PAGOTTO, R.C. et al. Análise de genotoxicidade aguda in vivo do extrato aquoso de Maytenus guyanensis Chichuá amazônico. Revista Brasileira de Farmacognosia, v. 25, n. 2, p. 164-169, 2015.
LEME, D.M.; MARIN-MORALES, M.A. Allium cepa test in environmental monitoring: A review on its application. Mutation Research/Reviews in Mutation Research, v. 692, p. 71-81, 2009.
MELLO, M.L.S.; VIDAL, B.C. A reação de Feulgen. Ciência e Cultura, v. 30: p. 665-676, 1978.
CARVALHO, L.G.; BRITTO, F.F.; MARIN-MORALES, M.A.; MAFFEI, E.M.D. Análises citológicas do inseticida Deltametrina usando o Teste de Micronúcleo. Revista da Biologia, v. 17, n.1, p.1-5, 2017.
ANACLETO, L.R.; ROBERTO. M.M., MARIN-MORALES, M.A. Toxicological effects of the waste of the sugarcane industry, used as agricultural fertilizer, on the test system Allium cepa. Chemosphere, v. 173, p. 31-42, 2017.
MENEGUETTI, D.U.O.; SILVA, F.C.; ZAN, R.A.; POLETTO, P.O.; RAMOS, L.J. et al. Adaptação da técnica de micronúcleo em Allium cepa, para futuras análises de mutagenicidade dos rios da região do vale do Jamari, Rondônia, Amazônia ocidental. Revista Pesquisa & Criação, v. 10, n. 2, p. 181-187, 2011.
GUERRA, M.; SOUZA, M.J. Como observar os cromossomos: um guia de técnicas em citogenética vegetal, animal e humana. Ribeirão Preto: Fundação de Pesquisas Científicas de Ribeirão Preto, 2002.
BUESA, R.J. Histology without formalin? Annals of Diagnostic Pathology, Philadelphia, n. 12, p. 387-396, 2008.
MENEGUETTI, D.U.O.; SILVA, F.C.; ZAN, R.A.; RAMOS, L.J.; et al. Adaptation of the micronucleus technique in Allium cepa, for mutagenicity analysis of the Jamari river valley, western Amazon, Brazil. Journal of Environmental & Analytical Toxicology, v. 2, n. 2, p. 1-3, 2012.
MENEGUETTI, D.U.O.; LIMA, R.A.; SILVA, J.B.; SILVA, R.P.; PAGOTTO, R.C.; FACUNDO, V.A. Análise Citotóxica e Mutagênica do Extrato Aquoso de Maytenus guyanensis Klotzsch Ex Reissek (Celastraceae) Chichuá (Xixuá) Amazônico. Ciência e Natura, v. 36, n. 3, p. 301-309, 2014.
MAZZEO, D.E.C.; FERNANDES, T.C.C.; LEVY, C.E.; FONTANETTI, C.S.; MARIN-MORALES, M.A. Monitoring the natural atenuation of sewage sludge toxicity using the Allium cepa test. Ecological Indicators, v. 56, p. 60–69, 2015.